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24.水稻稻米颜色有黑色、褐色、白色3种类型，由3对等位基因控制（用A/a、B/b、D/d表示）。25.多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，猪肉是我国主要的肉类消费品，提高其PUFAs现有纯合黑色水稻品系甲与纯合白色水稻品系乙，将品系甲和品系乙杂交，获得F，F稻米颜色全含量对居民健康具重要意义。为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制为黑色。将F和品系乙杂交，获得F2，F2稻米颜色及比例为：黑色：白色：褐色=1：4：3。请回PUFAs合成的必需酶基因fat-1，培育转fat-1基因猪，操作过程如图，图中GFP基因表达出绿色荧答下列问题：光蛋白。请回答下列问题：（1）A/a基因的遗传遵循基因的定律，将F的3对等位基因（A/a、B/b、D/d表示）标注fat-1基因在示意图中的染色体上的DNA片段HindIⅢI启动子fat-1基因fat-1基因启动子Ecok连接导入大肠HindⅢI筛选重组转染猪成纤产物秆菌维细胞BamH质粒GFP基因终止子质粒终止子（2）已知三对等位基因控制稻米颜色的机制如下：GFP基因基因A基因B基因D（1）利用PCR技术扩增fat-1基因时，为了将目的基因与质粒定向连接，应在引物的（填“5端”或“3端”）分别加上限制酶识别与切割的序列；（2）图中所构建的基因表达载体启动子的作用是酶A酶B酶D初始色素中间色素1中间色素2最终色素（3）图中的连接产物需要导入大肠杆菌中，在导入前一般先用Ca+处理大肠杆菌，使其处于一种的生理状态，进而在适宜的条件下将连接产物导入其中。结合该机制，从F2的表型及比例分析，导致稻米呈现褐色的色素是。F自交后（4）将重组表达载体转染猪成纤维细胞作为实验组，另设一组空白对照。48小时后于荧光显微镜代中褐色水稻所占比例为下观察到，说明转染成功。然后以细胞为核供体（3）一个水稻品系往往只有一种基因型，褐色水稻的纯合品系应有种。在日常生产中，我们构建克隆胚胎，最终获得转fat-1基因猪。可以考虑利用F，通过育种方式（答出两种）来获取纯合褐色水稻品系。还可以利用琼脂糖凝胶电泳技术检测相关水稻的基因组成，最终筛选出相应的纯合植株。下列编号①~的水稻电泳结果中，可以作为褐色水稻纯合品系的有（多选）。①②③④5第9页共10页第10页共10页